- 汉英医学分子生物学实验方法
汉英医学分子生物学实验方法
1 质粒
1.1 用碱裂解并SDS法制备小量质粒DNA
1.2 聚乙二醇沉淀法纯化质粒DNA
1.3 用QIAGEN质粒大提试剂盒制备大量质粒DNA
1.4 用氯化钙制备和转化大肠杆菌感受太细胞
1.5 定向克隆到质粒载体
1.6 PCR产物克隆至T载体
2 聚合酶链式反应
2.1 聚合酶链式反应体外扩增DNA
2.2 反转录聚合酶链式反应
2.3 实时定量PCR
3 常用的凝胶电泳
3.1 核酸凝胶电泳
3.1.1 琼脂糖凝胶电泳
3.1.2 聚丙烯酰胺凝胶电泳
3.2 蛋白质凝胶电泳
3.2.1 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳
3.2.2 双相电泳
4 放射性探针的制备
4.1 均一标记DNA探针的合成
4.2 RNA探针的合成
4.3 CDNA探针的合成
4.4 合成寡核苷酸的标记
5 DNA
5.1 用QIAquick凝胶提取试剂盒从琼脂糖凝胶中回收和纯化DNA片段
5.2 哺乳动物细胞DNA的分离
5.2.1 应用蛋白酶K和苯酚从哺乳动物细胞中分离高分子量的DNA
5.2.2 鼠尾和其他小样本基因组DNA的制备
5.3 Southern杂交分析基因组DNA
5.4 DNA的斑点与狭缝杂交
5.5 微点阵技术
5.6 DNA测序
5.7 单链构象多态性分析
5.8 变性的高效液相色谱
5.9 DNA基因分型
5.9.1 微卫星基因分型
5.9.2 PCR-RFLP SNP 基因分型
5.9.3 焦磷酸测序SNP基因分型
6 RNA
7 克隆基因在体外及原核细胞中的表达
8 克隆基因在哺乳动物细胞中的表达
9 病毒
10 蛋白质检测与分析
11 真核基因表达调控
12 组织学
13 蛋白质组学技术
14 细胞凋亡的检测方法
15 转基因和基因敲除小鼠的构建
附录1 常用的试剂和溶液
附录2 常用的生物学网站
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